磁珠偶联抗原

活化

移取 0.5mL (10mg) 的 BioMagPlus 羧基磁珠至 15mL 尖头离心管内，并放置在磁分离架上直到上清液变完全透彻后，用吸管小心移弃上清。
加 5mL of MES 缓冲液充分混匀洗涤. 将离心管放在磁分离架上直到上清液变清后.用吸管小心移弃上清。重复 Step 2, 三次. 最后一次洗涤后, 重悬磁珠于 5mL 的 MES 缓冲液中。
活化试剂（），剧烈振荡摇匀。
室温下，将离心管置于旋转混匀仪上活化反应 30 分钟。反应过程中，注意不让磁珠沉淀聚积在一起。将离心管放在磁分离架上直到上清液变清后.用吸管小心移弃上清。重复 Step 2, 四次。

蛋白偶联
计算需要偶联的蛋白，抗体量. 一般地，每mg活化的羧基磁珠可以偶联20-500ug的蛋白（抗体）。可适量添加一些载体蛋白，如BSA Fraction V，增加反应体系中的总蛋白量，从而可以起到一定的封闭作用。保证抗体偶联的正确方向。
将蛋白加至 5mL MES 缓冲液中。
（吸取 50μL 蛋白液于950μL的MES缓冲中. 配成1：20的稀释液. 标记为偶联反应前蛋白液.置于一旁用于后面的偶联率计算。）
将剩下的蛋白液加到装有活化磁珠的离心管内，剧烈振荡混匀，室温下，将离心管置于旋转混匀仪上偶联反应16-24小时。
（将离心管放在磁分离架上直到上清液变清后.用吸管小心收集上清. 标记为偶联后蛋白液，用于计算偶联率。）
重悬磁珠于 5mL MES 缓冲液中，振荡摇匀。将离心管放在磁分离架上直到上清液变清后.用吸管小心移弃上清。
重复 Step 6, 一次
加 5mL 的淬灭液，振荡摇匀，室温下，将离心管置于旋转混匀仪上 30 分钟。
将离心管放在磁分离架上直到上清液变清后.用吸管小心移弃上清。

洗涤和贮存偶联后的磁珠
加 5mL 洗涤缓冲液并剧烈振荡摇匀。将离心管放在磁分离架上直到上清液变清后.用吸管小心移弃上清。
重复 Step 1, 三次。
最后一次洗涤后, 重悬磁珠于 2mL 洗涤缓冲液内，此时磁珠的浓度约为5 mg/mL.
置于 2-8摄氏度保存。
0.05M MES配方 ：2-（N-吗啉代）乙磺酸，用超纯水配制即可

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